Hipótesis: Las gramíneas expuestas a altos niveles de contaminación urbana expresan nuevos alérgenos, que podrían ser causa de los síntomas en pacientes hasta ahora no determinados clínicamente.
Objetivos:
1) Obtención de proteínas naturales de la familia de las LTPs y TLPs y recombinantes en un sistema heterólogo de expresión de Lolium perenne (Gramínea salvaje) y caracterización inmunológica por técnicas in vitro.
2) Estudiar mediante pruebas cutáneas y Test de Activación de Basófilos (TAB) la sensibilización in vivo e in vitro a estas proteínas sobreexpresadas por la contaminación.
3) Determinar la respuesta clínica mediante Test de Provocación Nasal.
4) Comparar la sensibilización y alergia clínica a LTP y TLP de L. perenne según grado de exposición y contaminación urbana.
Metodología:
Obtención y producción de las familias de LTP y TLP sobreexpresadas por alta contaminación. Caracterización de su capacidad de unión a IgE mediante inmunotransferencia y ELISA directo y/o inhibición con sueros de pacientes alérgicos. Se realizarán test cutáneos, TAB y Test de Provocación Nasal con las proteínas naturales, recombinantes y polen de L. perenne de zonas contaminadas vs no contaminadas para valorar sensibilización y síntomas clínicos en pacientes alérgicos a gramíneas en los tres centros participantes con diferente exposición y contaminación (Madrid, Ciudad Real y Alicante).
