Hipòtesi: Les gramínies exposades a nivells elevats de contaminació urbana expressen nous al·lergògens, que podrien ser la causa dels símptomes en pacients fins ara no determinats clínicament.
Objectius:
1) Obtenció de proteïnes naturals de la família de les LTPs i TLPs i recombinants en un sistema heteròleg d’expressió de Lolium perenne (gramínia salvatge) i caracterització immunològica mitjançant tècniques in vitro.
2) Estudiar, mitjançant proves cutànies i Test d’Activació de Basòfils (TAB), la sensibilització in vivo i in vitro a aquestes proteïnes sobreexpressades per la contaminació.
3) Determinar la resposta clínica mitjançant Test de Provocació Nasal.
4) Comparar la sensibilització i l’al·lèrgia clínica a LTP i TLP de L. perenne segons el grau d’exposició i contaminació urbana.
Metodologia:
Obtenció i producció de les famílies de LTP i TLP sobreexpressades per alta contaminació. Caracterització de la seua capacitat d’unió a IgE mitjançant immunotransferència i ELISA directe i/o inhibició amb sèrums de pacients al·lèrgics. Es realitzaran tests cutanis, TAB i Test de Provocació Nasal amb les proteïnes naturals, recombinants i pol·len de L. perenne de zones contaminades vs no contaminades per valorar la sensibilització i els símptomes clínics en pacients al·lèrgics a gramínies en els tres centres participants amb diferent exposició i contaminació (Madrid, Ciudad Real i Alacant).
