Biomarcadors indicadors d’alteracions en l’Alzheimer de la via apoE i l’APP, i la seua validació en models cel·lulars (CHIVAT‑AD)

Durant els últims anys hem investigat alteracions en diversos processos moleculars clau en la malaltia d’Alzheimer (AD), particularment la via de senyalització de l’apolipoproteïna E (apoE) i el metabolisme del precursor amiloide APP; l’aproximació fonamental ha sigut l’estudi d’extractes de cervell i de LCR de malalts d’AD. Ací plantegem un desenvolupament més profund de la vessant en biomarcadors i la validació de les troballes en models cel·lulars humans, cèl·lules iPS; cosa que permetrà la correcta interpretació de les alteracions detectades. Aquest model d’iPSc s’implementarà amb co-cultius combinant línies isogèniques de variants, i KO, per a APOE, la qual cosa serà d’alta utilitat per desxifrar la interacció neuronal-glial, particularment en el context de la senyalització defectuosa per apoE, la desregulació de la hiperfosforilació de tau i el processament patològic de β-amiloide. També validarem amb iPSc generades d’un pacient amb mutació en ADAM10 la rellevància de la insuficiència en α-secretasa. En concret, centrarem la nostra atenció a estudiar els nivells de les espècies d’apoE i dels seus (co)receptors (apoER2, LRP3, Trem2, Sorl1, NMDA‑R), APP (glicosilació i fragmentació), així com de les secretases (ADAM10, meprin β, BACE1, PS1 i les seues interrelacions). L’aproximació basada en l’anàlisi electroforètic i la combinació d’anticossos específics per a dominis diferents ens permetrà discriminar proteïna completa de fragments. Les alteracions en la glicosilació s’analitzaran mitjançant interacció amb lectines. Caracteritzar aquests canvis també pot ser d’interés per al desenvolupament de nous biomarcadors i per refinar-ne la determinació. La nostra hipòtesi final és que el desbalance de totes aquestes proteïnes té un nexe comú en la via apoE, cosa que impulsa el progrés de la patologia més enllà de la presència d’un polimorfisme o variant al·lèlica (apoE4) com a factor de risc.